製品情報

抗体精製カラム

MonoSpin®ProA、MonoSpin®ProG

MonoSpin ProA, MonoSpin ProGは、抗体精製用のシリカモノリスカラムです。硬質ゲルにアフィニティリガンド(Protein A, Protein G)を結合させているので通液速度が上げられ、迅速に試料中の抗体を回収、精製することが可能です。精製スタイルに合わせて3種類の形状から選択できます。

仕様

製品形状
スピンカラムタイプ
Lタイプ
96ウェルプレートタイプ
サンプル量
50µL~500µL
~8mL
50µL~500µL
溶出液量
50µL~
2mL~
50µL~
抗体
負荷量
ProA
400µg
16mg
400µg
ProG
300µg
12mg
300µg
操作方法
1.7mL、2mLのマイクロチューブにセットして、遠心により精製します
アダプターを用いて50mL遠沈管にセットし、遠心により精製します
遠心、または減圧吸引により精製します
所要時間
10分
20分
10分

形状

カラムタイプの画像

カラムタイプ

Lタイプの画像

Lタイプ

96ウェルプレートタイプの画像

96ウェルプレートタイプ

10分以内で抗体精製を実現

担体に硬質なシリカモノリスを使用することで、従来法のソフトゲルでは実現できなかった高速処理が可能となりました。遠心分離機での遠心操作により、わずか10分で抗体が精製できます。

抗体精製が10分で完了の図
抗体濃度の測定の図

抗体濃度の測定

回収液電気泳動結果例の図

回収液電気泳動結果例

カラム性能

MonoSpin ProAは0.4 mgまでのIgGを90 %以上回収することができます。
MonoSpin ProGは0.3 mgまでのIgGを90 %以上回収することができます。
MonoSpin ProGはProAでは回収できないIgG3の抗体も精製回収可能です。

MonoSpin ProA(左)、ProG(右)のIgG添加量-回収量プロットの図

MonoSpin ProA(左)、ProG(右)のIgG添加量-回収量プロット

溶出液量100µLで90%以上の回収率を実現

MonoSpin ProAでは100µL以下の溶出液量で90%以上の回収率を示します。T社・G社製品では、溶出液を400µL以上必要とするため回収液は希釈されてしまいます。また回収率も70%以下です。

溶出液量の図

安定した回収率、再現性

MonoSpin 96 ウェルプレートタイプを用いて、CHO細胞培養液から抗体を精製しました。96サンプルの処理においても安定した回収率、再現性を得ることができます。

吸光度Abs図

96ウェルプレートによる抗体の精製結果

吸着溶液にヒトポリクローナル抗体を添加した試料を用いてMonoSpinProA 96WPで精製を行い、溶出液の吸光度を測定しました。
各ウェルともバラツキなく精製することができます。

抗体添加量0.01 mg-1.6 mg(100 µL×2回)
洗浄 : 1M NaCl-リン酸緩衝液
(pH=7, 100 µL×2回)
溶出 : 0.1M クエン酸緩衝液
(pH=3, 60 µL×3回)
吸引条件 : 0.016MPa

吸光量と抗体添加量のグラフ

希薄な試料を連続通液にて濃縮可能

原液(ヒトIgG 0.025 mg/mL)の抗体溶液500µLをカラムに連続的に10回アプライし、溶出液量100µLで2回溶出し、各溶出液の抗体濃度を確認しました。溶出1回目において90%以上が回収され、得られる抗体濃度は原液の50倍に濃縮されています。カラム負荷量を超えない限り、通過液画分、洗浄画分には抗体の漏えいはほとんど見られません。貴重な抗体サンプルをカラム内の微小空間(ゲル容量20µL)に高密度に固定化することも可能になります。

吸光量Absグラフ図

高活性を維持して抗体固定が可能

Agarose Bead を用いた抗体固定では、抗体負荷後にクロスリンクを行うため、抗体中のいくつかの結合サイトが架橋され、アフィニティの失活が起こる場合がありました。MonoSpin proA, ProGでは、クロスリンクを行いながら抗体を負荷させるため、従来法よりも欠損が少ないアフィニティカラムが作製できます。

アフィニティカラム作製法の説明
アフィニティカラム作製法の説明2

品名輸送区分SDS入数Cat.No.価格
MonoSpin ProA カラムタイプ冷蔵JPN10本7510-1131019,000
MonoSpin ProG カラムタイプ冷蔵JPN10本7510-1131121,000
MonoSpin ProA ウェルプレートタイプ冷蔵JPN1枚7510-1131282,000
MonoSpin ProG ウェルプレートタイプ冷蔵JPN1枚7510-1131393,000
MonoSpin L ProA冷蔵JPNENG4本7510-1131484,000
MonoSpin L ProG冷蔵JPN4本7510-1131595,000
MonoSpin ProA/G Buffer kit冷蔵JPN1式7510-1131651,000

注1)冷蔵は、冷蔵輸送品です。別途、冷蔵梱包費¥1,000 を請求させていただきます。
注2)カラムタイプ、96ウェルプレートタイプには、精製に必要な各種試薬が付属しています。
注3)カラムタイプには、回収用チューブ10本、廃液用チューブ10本が付属しています。
注4)Lタイプには、遠心アダプターが付属しています。